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賽默飛世爾推出甲型H1N1流感病毒RNA提取的方法,通過 KingFisher系列磁珠提取純化技術(shù),結(jié)合一些磁珠試劑盒,如Macherey-Nagel公司的NucleoMag Virus kit,Invitek公司的InviMag Virus RNA kit,Ambion(ABI)MagMAX Viral kit,Roche公司Magna Pure RNA or total NA kit,chemagen公司的Chemagic Viral Kit等,可在15-30分鐘內(nèi)提取96個(gè)樣品的病毒RNA,提取的高質(zhì)量RNA可直接進(jìn)行real-time RT-PCR,確診樣品是否含有甲型H1N1流感病毒。世界衛(wèi)生組織(WHO)于2009年4月28日公布的CDC qRT-PCR檢測(cè)方法中磁珠法純化病毒RNA作為甲型H1N1流感病毒診斷實(shí)驗(yàn)步驟中核酸提取的方法之一。
賽默飛世爾的KingFisher系列磁珠分離技術(shù)已經(jīng)通過美國國家獸醫(yī)服務(wù)實(shí)驗(yàn)室(NVSL)認(rèn)證可用于AI/ND病毒,并成功用于禽流感病毒,新城疫病毒,牛腹瀉病毒等傳染性疾病的檢測(cè)和診斷,總體時(shí)間約4個(gè)小時(shí)。詳細(xì)情況請(qǐng)參考賽默飛世爾公司參與推出禽流感高通量檢測(cè)新技術(shù)。該檢測(cè)技術(shù)同樣適用于甲型H1N1流感病毒的高通量檢測(cè)。
KingFisher可以從生物體液和無細(xì)胞樣品中,如血清、血漿、口腔拭子和細(xì)胞培養(yǎng)液中,提取病毒RNA。從無細(xì)胞樣品中分離純化RNA比從組織和培養(yǎng)細(xì)胞中分離純化RNA更具挑戰(zhàn)性。這是因?yàn)榈偷牟《镜味?、大的操作體積和樣品的復(fù)雜性,且操作步驟須適合實(shí)時(shí)定量RT-PCR。使用KingFisher自動(dòng)化磁珠提取方法可滿足上述各項(xiàng)要求,賽默飛世爾公司的KingFisher磁珠提取技術(shù),不需有機(jī)溶劑或RNA沉淀步驟,消除了基于濾膜的方法經(jīng)常碰到的問題,如濾膜堵塞、大的洗脫體積和不穩(wěn)定的產(chǎn)率,同時(shí)保了95%以上的磁珠回收率,保痕量樣品RNA的充分提取。而結(jié)合后續(xù)的實(shí)時(shí)定量RT-PCR,可儀檢測(cè)到低至10拷貝的病毒RNA,很大增強(qiáng)了甲型H1N1流感病毒檢測(cè)的靈敏度。
基于KingFisher磁珠純化系統(tǒng)的甲型H1N1流感病毒RNA提取的方法優(yōu)勢(shì)如下:
很高靈敏度:可從100-400ul樣品中分離到少至10拷貝的病毒RNA
檢測(cè)速度快:對(duì)于96個(gè)樣品,整個(gè)磁珠提取純化病毒RNA過程為15-30分鐘,整個(gè)甲型流感檢測(cè)過程不過4個(gè)小時(shí)
衡量樣品的檢測(cè):真實(shí)反映痕量病毒樣品的含量,避免假陰性線性純化效率低至50轉(zhuǎn)錄子
經(jīng)美國國家獸醫(yī)服務(wù)實(shí)驗(yàn)室(NVSL)認(rèn)證可用于AI/ND病毒
此外,賽默飛世爾科技還提供與甲型H1N1流感病毒RNA檢測(cè)相關(guān)的整體解決方案,包括從取樣,傳送,分離,病理學(xué)確認(rèn),分子生物學(xué)鑒定,樣品保存。從耗材到儀器包括:低溫保存系統(tǒng):液氮罐和低溫冰箱,取樣傳送的耗材:Nunc/Nalgene的取樣瓶,試管,帶濾芯的TIP頭,各種移液器等,Nanopure UF和Nanopure UV/UF純水儀提供無核酸酶的純水,具備生物認(rèn)證的Pico&Fresco17/Micro17&17R微量離心機(jī)等,如需要更多信息,歡迎訪問www.thermo.com.cn或致電800-810-5118。
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